什么是 StellarScript 产品组合？
The StellarScript® portfolio includes three reverse transcriptase enzymes: StellarScript、StellarScript HT 和 StellarScript HT+。StellarScript 逆转录酶（RT）是一种 M-MLV RT 变体，其热稳定性得到改进且 RNase H 活性降低。与野生型 M-MLV RT 相比，这些酶具有更高的特异性、更高的 cDNA 产率和更长的 cDNA 产物。StellarScript HT 和 HT+ 专为提高热稳定性和抑制剂耐受性而经过工程设计。StellarScript 和 StellarScript HT+ 拥有模板切换活动。
StellarScripts 有哪些潜在应用？
- 第一链 cDNA 合成
- 在高温和存在抑制剂的情况下的第一链 cDNA 合成
- 单步和两步 RT-qPCR
- 引物延伸
- 单细胞 RNA 测序（适用于具有模板切换功能的 StellarScripts）
我应该何时使用 StellarScript、StellarScriptHT 或 StellarScriptHT+
StellarScript 非常适合需要低温、第一链合成的应用，包括一些反应珠上应用。
StellarScript HT 可用于不需要在 50°C 下进行模板切换的应用程序。
当输入可能含有抑制剂或高盐浓度时，当温度高于 50°C 或需要模板切换时，应使用 StellarScript HT+。
RNase 抑制剂可以与 StellarScripts 一起使用吗？
RNase 抑制剂不包含在该试剂盒中，也不是第一链合成所必需的，但添加 RNase 抑制剂通常会增加 cDNA 的产量。如果 RNA 起始量来自粗样品或潜在的 RNase 污染样品，强烈建议使用 RNase 抑制剂。
是否建议使用 DDT？
不，建议在第一链合成中最低终浓度为 1 mM DTT。某些 RNase 抑制剂需要额外的 DTT 才能获得最佳活性。有关 DTT 要求，请参阅生产商说明。
StellarScripts 兼容哪些起始量类型？
StellarScript HT+适用于降解 RNA，例如衍生自 FFPE 的 RNA，起始量范围为 10 pg 至 1 μg。
在 StellarScript 酶中 RNase H 活性是如何关闭的？
所有 StellarScript 酶的 RNaseH 的催化结构域都被完全敲除，但 RNaseH 结构域保持完整。
三个 StellarScripts 使用了什么储存缓冲液？
储存缓冲液和反应缓冲液的组成在所有三种酶中是相同的，并在我们的用户指南中公布。
StellarScript 模板可以切换吗？
StellarScript 和 StellarScript HT+ 的模板切换能力最好。
哪种 StellarScript 抑制剂耐受性最好？
StellarScript HT+ 对抑制剂的耐受性最好，对 PCR 的抑制作用最小。
RT 性能的一般考虑因素是什么？
StellarScript 的最佳温度为 42°C。HT 和 HT+ 的最佳温度为 50°C。如果您的应用需要超过 50°C，那么我们建议使用 HT+。
次级结构如何从 RNA 中移除？
反应温度为 42 - 50°C 时，RNA 靶标的次级结构松弛，产物长度增加。
如果 StellarScript HT+ 在 42- 65°C 时是活性的，我应该在什么温度下进行反应？
为了减少 RNA 次级结构，我们建议第一链合成温度从 50 - 55°C 开始。温度 > 55°C 应仅在应用程序需要时运行。
