StellarScript 逆转录酶产品组合

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为尖端应用提供燃料的精密酶

The StellarScript® Reverse Transcriptase (RT) portfolio features three M-MLV variants with reduced RNase H activity and enhanced processivity, activity, thermostability, and inhibitor tolerance in comparison to wild-type enzyme. 试剂盒包含 cDNA 合成所需的所有试剂 （引物除外）。该产品组合包括：

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量身定制的逆转录酶，以满足您的应用需求

  特性 应用
  最佳
温度		 热的
稳定性		 抑制剂
耐受性		 模板
切换		 RT-qPCR/
qRT-PCR		 RT-PCR RNA-测序 scRNA-测序 5′ RACE 3′ RACE
StellarScript 42˚C + + + + + + + + +
StellarScript HT 42 – 50˚C ++ ++ - ++ ++ + - - +
StellarScript HT+ 42 – 65˚C +++ +++ + +++ +++ + + + +

表 1. StellarScript 产品组合酶特性和相关应用概述。 “+”号表示特定酶的特性强度或应用的适合性。

通过提高热稳定性提高特异性

许多 RNA 物种中的高度二级结构 （例如高 GC 转录本），会使全长度 cDNA 的生成变得有难度，并降低整体检测的灵敏度。逆转录温度升高会使二级结构松弛，但这种方法需要高度耐热的逆转录酶。StellarScript 产品组合包含具有各种最佳逆转录温度范围的变体，以提高 cDNA 产品的特异性。

‭‬图 1A. 用热稳定的 RT 克服 RNA 模板二级结构。如图所示，StellarScript、StellarScript HT 和 StellarScript HT+ 在 oligo-dT 引发的第一链合成中运行 30 分钟，并使用 0.5 至 9 kb RNA 梯。逆转录酶热稳定性从 StellarScript 增加到 StellarScript HT 和 StellarScript HT+。
‭‬图 1B. 用热稳定的 RT 克服 RNA 模板二级结构。StellarScript、 StellarScript HT 和 StellarScript HT+ 在 42°C、50°C、60°C 或 65°C 的 oligo-dT 引发的第一链合成中运行 30 分钟，并使用 10 ng 总肝 RNA 作为模板。通过 qPCR 评估得到的 cDNA 质量。StellarScript 和 StellarScript HT 活性在温度高于 50°C 时会下降，而 StellarScript HT+ 则不会。
高温下的活动
‭‬图 1A. 用热稳定的 RT 克服 RNA 模板二级结构。如图所示，StellarScript、StellarScript HT 和 StellarScript HT+ 在 oligo-dT 引发的第一链合成中运行 30 分钟，并使用 0.5 至 9 kb RNA 梯。逆转录酶热稳定性从 StellarScript 增加到 StellarScript HT 和 StellarScript HT+。
图 1A. 用热稳定的 RT 克服 RNA 模板二级结构。 如图所示，StellarScript、StellarScript HT 和 StellarScript HT+ 在 oligo-dT 引发的第一链合成中运行 30 分钟，并使用 0.5 至 9 kb RNA 梯。逆转录酶热稳定性从 StellarScript 增加到 StellarScript HT 和 StellarScript HT+。
‭‬图 1B. 用热稳定的 RT 克服 RNA 模板二级结构。StellarScript、 StellarScript HT 和 StellarScript HT+ 在 42°C、50°C、60°C 或 65°C 的 oligo-dT 引发的第一链合成中运行 30 分钟，并使用 10 ng 总肝 RNA 作为模板。通过 qPCR 评估得到的 cDNA 质量。StellarScript 和 StellarScript HT 活性在温度高于 50°C 时会下降，而 StellarScript HT+ 则不会。
图 1B. 用热稳定的 RT 克服 RNA 模板二级结构。 StellarScript、 StellarScript HT 和 StellarScript HT+ 在 42°C、50°C、60°C 或 65°C 的 oligo-dT 引发的第一链合成中运行 30 分钟，并使用 10 ng 总肝 RNA 作为模板。通过 qPCR 评估得到的 cDNA 质量。StellarScript 和 StellarScript HT 活性在温度高于 50°C 时会下降，而 StellarScript HT+ 则不会。
各种 RNA 输入和质量的高质量性能

StellarScript 产品组合在广泛的 RNA 输入和质量范围内提供出色的性能，包括高度受损的福尔马林固定石蜡包埋材料和低至 10 pg 的输入。这提供了广泛的应用程序和样品类型兼容性。

‭‬图 2A. 从低输入和降解的 RNA 样品中生成 cDNA。StellarScript、StellarScript HT 和 StellarScript HT+ 在 oligo-dT 中运行，并且在 42°C （StellarScript） 或 50°C （HT and HT+）下随机引发的第一链合成 40 分钟，并使用 100 ng 至 0.01 ng 总肝 RNA 作为模板。通过 qPCR 评估得到的 cDNA 产量。当在其最佳温度范围内使用逆转录时，所有酶都显示出相似的灵敏度。
‭‬图 2B. 从低输入和降解的 RNA 样品中生成 cDNA。如图所示，StellarScript、StellarScript HT 和 StellarScript HT+ 在 oligo-dT 中运行，并使用来自两个独立福尔马林固定石蜡包埋模块的总 RNA 起始量，在 50°C 下随机引发第一链合成 30 分钟。通过 qPCR 评估得到的 cDNA 产量。所有酶都表现出类似的敏感性。
跨样品起始量和质量的可靠性能
‭‬图 2A. 从低输入和降解的 RNA 样品中生成 cDNA。StellarScript、StellarScript HT 和 StellarScript HT+ 在 oligo-dT 中运行，并且在 42°C （StellarScript） 或 50°C （HT and HT+）下随机引发的第一链合成 40 分钟，并使用 100 ng 至 0.01 ng 总肝 RNA 作为模板。通过 qPCR 评估得到的 cDNA 产量。当在其最佳温度范围内使用逆转录时，所有酶都显示出相似的灵敏度。
图 2A. 从低起始量和降解的 RNA 样品中生成 cDNA。 StellarScript、StellarScript HT 和 StellarScript HT+ 在 oligo-dT 中运行，并且在 42°C （StellarScript） 或 50°C （HT and HT+）下随机引发的第一链合成 40 分钟，并使用 100 ng 至 0.01 ng 总肝 RNA 作为模板。通过 qPCR 评估得到的 cDNA 产量。当在其最佳温度范围内使用逆转录时，所有酶都显示出相似的灵敏度。
‭‬图 2B. 从低输入和降解的 RNA 样品中生成 cDNA。如图所示，StellarScript、StellarScript HT 和 StellarScript HT+ 在 oligo-dT 中运行，并使用来自两个独立福尔马林固定石蜡包埋模块的总 RNA 起始量，在 50°C 下随机引发第一链合成 30 分钟。通过 qPCR 评估得到的 cDNA 产量。所有酶都表现出类似的敏感性。
图 2B. 从低起始量和降解的 RNA 样品中生成 cDNA。 如图所示，StellarScript、StellarScript HT 和 StellarScript HT+ 在 oligo-dT 中运行，并使用来自两个独立福尔马林固定石蜡包埋模块的总 RNA 起始量，在 50°C 下随机引发第一链合成 30 分钟。通过 qPCR 评估得到的 cDNA 产量。所有酶都表现出类似的敏感性。
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低至 10 pg 的稳健 cDNA 合成，具有模板转换活性。

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改进的热稳定性和抑制剂耐受性提高了与具有挑战性的应用的兼容性。

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